氨基酸自動(dòng)分析儀是一種用于測定蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物中氨基酸含量的儀器。它能夠對氨基酸進(jìn)行自動(dòng)分析,主要依賴(lài)于以下幾個(gè)關(guān)鍵步驟和技術(shù)原理:
1、樣品預處理:在進(jìn)行分析之前,需要將蛋白質(zhì)樣品水解成單個(gè)氨基酸。這通常通過(guò)酸水解、堿水解或酶水解等方法實(shí)現。水解后的樣品需要經(jīng)過(guò)脫鹽、濃縮等處理,以便于后續分析。
2、衍生化反應:為了提高氨基酸的檢測靈敏度和選擇性,通常需要對氨基酸進(jìn)行衍生化處理。常用的衍生化試劑有鄰苯二甲醛(OPA)和氨基酮酸(AAA)等。衍生化反應使氨基酸生成具有熒光或紫外吸收特性的產(chǎn)物,便于后續檢測。
3、色譜分離:衍生化后的氨基酸通過(guò)液相色譜(LC)或離子交換色譜(IEC)進(jìn)行分離。色譜柱內的固定相具有特定的選擇性,能夠根據氨基酸的性質(zhì)將其分離。常用的色譜柱有陽(yáng)離子交換柱、陰離子交換柱和反相色譜柱等。

4、洗脫和檢測:分離后的氨基酸通過(guò)洗脫液從色譜柱中洗脫出來(lái),然后進(jìn)入檢測器進(jìn)行檢測。常用的檢測器有熒光檢測器、紫外檢測器和質(zhì)譜檢測器等。檢測器根據氨基酸衍生物的光學(xué)或質(zhì)譜特性,生成相應的信號。
5、數據處理和分析:檢測器產(chǎn)生的信號被傳輸到數據處理系統,通過(guò)積分、校正和比對等處理,最終得到氨基酸的定量結果。數據處理系統還可以對數據進(jìn)行存儲、輸出和報告生成等操作。
6、自動(dòng)化控制:整個(gè)分析過(guò)程由計算機控制系統進(jìn)行自動(dòng)化控制??刂葡到y可以實(shí)現樣品加注、衍生化反應、色譜分離、洗脫、檢測和數據處理等步驟的自動(dòng)控制,提高分析效率和準確性。
總之,氨基酸自動(dòng)分析儀通過(guò)對樣品進(jìn)行預處理、衍生化、色譜分離、洗脫和檢測等步驟,實(shí)現了對氨基酸的自動(dòng)分析。這一過(guò)程依賴(lài)于先進(jìn)的液相色譜技術(shù)、離子交換技術(shù)、熒光或紫外檢測技術(shù)以及自動(dòng)化控制技術(shù),能夠高效、準確地測定蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物中的氨基酸含量。